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Clorofila a e b e carotenoides por absorbâncias (Arnon, Lichtenthaler e Porra)

Informe as absorbâncias, o volume do extrato, a massa fresca e a diluição para ver as clorofilas a, b e total, a razão a/b e os carotenoides.

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Conjunto de equações

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Equações por conjunto

Arnon: Ca = 12,7·A663 − 2,69·A645, Cb = 22,9·A645 − 4,68·A663; Lichtenthaler e Wellburn: Ca = 12,21·A663 − 2,81·A646, Cb = 20,13·A646 − 5,03·A663, carotenoides = (1000·A470 − 3,27·Ca − 104·Cb) ÷ 229; Porra: Ca = 12,25·A663,6 − 2,55·A646,6, Cb = 20,31·A646,6 − 4,91·A663,6 (µg/mL, acetona 80%)

Com Arnon (1949), A663 = 0,52 e A645 = 0,215, o extrato tem clorofila a de 6,03 µg/mL, clorofila b de 2,49 e total de 8,52 (razão a/b de 2,42). Com extrato de 10 mL, diluição de 1× e 0,5 g de massa fresca, o teor é de 120,5 µg de clorofila a, 49,8 de clorofila b e 170,3 de total por grama.

Conjunto de Lichtenthaler e Wellburn

Com Lichtenthaler e Wellburn (1983) e A470 = 0,45, a clorofila a é 5,75 µg/mL, a b 1,71 e os carotenoides, 1,11 µg/mL (razão a/b de 3,36).

Conferência obrigatória

  • Os coeficientes foram transcritos da literatura (acetona 80%) sem acesso aos artigos originais neste repositório: confira com Arnon (1949), Lichtenthaler e Wellburn (1983) e Porra et al. (1989) antes de usar em trabalho formal.
  • Cada conjunto vale para um solvente e comprimentos de onda específicos; use o conjunto que combina com o seu extrato e a leitura do espectrofotômetro. No modo personalizado, os quatro coeficientes são seus.
  • A absorbância deve estar na faixa de boa leitura (cerca de 0,2 a 0,8); dilua o extrato se passar disso e informe a diluição.

Perguntas frequentes

Qual a calculadora de clorofila a e b por absorbância?

Meça as absorbâncias do extrato em 663 e 645 nm e aplique as equações do conjunto escolhido (Arnon, Lichtenthaler e Wellburn ou Porra); a página soma e divide pelo volume e pela massa.

Qual a equação de Arnon para clorofila?

Clorofila a = 12,7·A663 − 2,69·A645 e clorofila b = 22,9·A645 − 4,68·A663, em mg/L com acetona 80%. Confira com o artigo original.

Qual a absorbância de 663 e 645 nm para a clorofila?

Porque a clorofila a e a b absorvem de modos diferentes nesses comprimentos de onda; duas leituras dão duas equações para as duas concentrações.

Como calcular carotenoides pelo método de Lichtenthaler?

Com A470 e as clorofilas: (1000·A470 − 3,27·Ca − 104·Cb) ÷ 229 em acetona 80%. A página calcula quando você escolhe esse conjunto.

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