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Lei de Beer-Lambert: absorbância, transmitância e concentração

Escolha o que você sabe (absorbância, concentração ou transmitância) e informe ε e o caminho da cubeta para obter absorbância, transmitância e concentração.

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Entrada

O que você informa

Os campos de absorbância, concentração e transmitância só valem no modo correspondente; os outros são ignorados.

Própria da substância e do comprimento de onda. Obrigatório; digite 1 se só quer converter %T em absorbância.

Largura da cubeta. A convenção é 1 cm.

Usada no modo da concentração. Entre 0 e 4.

Usada no modo da absorbância. 1 µmol/L = 0,000001 mol/L.

Usada no modo da transmitância. Entre 0,01 e 100.

Resultado

O resultado aparece aqui.

As três relações da lei

A = ε × b × c

A = 2 − log10(%T) %T = 100 × 10^(−A)

A é a absorbância, sem unidade. ε é a absortividade molar em L/(mol·cm), própria de cada substância e de cada comprimento de onda. b é o caminho óptico, a largura da cubeta em cm; a convenção é 1 cm. c é a concentração: a página trabalha em µmol/L, que é 1 mol/L dividido por 1.000.000. %T é a transmitância em porcentagem.

A mesma amostra por três caminhos

Com A = 0,5, ε = 10.000 L/(mol·cm) e cubeta de 1 cm, a concentração é 50 µmol/L, e a transmitância é 31,623%.

Para 40 µmol/L com ε = 15.000, a absorbância é 0,6 e a transmitância, 25,119%.

Uma amostra que transmite 50% tem A = 0,301; com ε = 8.000, a concentração é 37,629 µmol/L.

Dobrando a cubeta para 2 cm, a mesma A = 0,5 com ε = 10.000 indica 25 µmol/L, metade do caso de 1 cm.

Limites da leitura espectrofotométrica

  • A absorbância pode ir de 0 a 4, que corresponde a transmitâncias de 100% a 0,01%.
  • No modo da transmitância, o campo ε só afeta a concentração; digite 1 se quer apenas converter %T em absorbância e ignore a concentração.
  • A relação linear vale para soluções diluídas e depende do equipamento: a faixa de absorbância confiável é a que o fabricante do espectrofotômetro indica.
  • O ε deve ser o da sua substância, no comprimento de onda da leitura; a página não traz valores de ε.

Perguntas frequentes

Como usar a lei de Beer-Lambert para achar a concentração?

Divida a absorbância pelo produto de ε e do caminho óptico: c = A ÷ (ε × b). Com A = 0,5, ε = 10.000 L/(mol·cm) e cubeta de 1 cm, c = 0,00005 mol/L, ou 50 µmol/L.

Como converter absorbância para transmitância?

Use %T = 100 × 10^(−A). Com A = 0,5, a transmitância é 31,623%. Com A = 1, são 10%; com A = 2, 1%. Cada unidade de absorbância reduz a transmitância a um décimo.

Como converter transmitância para absorbância?

Use A = 2 − log10(%T). Para 50% de transmitância, A = 2 − 1,699 = 0,3010. Para 100%, A = 0; para 1%, A = 2.

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