Cromatografia: Rf, resolução entre picos e pratos teóricos

Três medidas do cromatograma

Rf = distância do soluto ÷ distância da frente do solvente

Rs = 2 × (tR2 − tR1) ÷ (w1 + w2)

N = 16 × (tR ÷ w)²

O Rf usa as duas distâncias medidas a partir da linha de aplicação: divida sempre pela frente do solvente, não pela borda da placa. Na resolução, tR é o tempo de retenção e w a largura da base de cada pico, no mesmo tempo. O número de pratos teóricos vale para cada pico, com a largura da base dele.

Exemplo resolvido

Um soluto que andou 42,5 mm quando a frente chegou a 80 mm tem Rf de 0,53. Dois picos em 4,2 e 5,6 min, com larguras de base de 0,5 e 0,6 min, dão resolução de 2,55: 1,05 acima do limite de 1,5 que você informou. Os pratos teóricos são 1.129 no primeiro pico e 1.394 no segundo.

Com picos em 6,1 e 6,5 min e larguras de 0,7 e 0,8 min, a resolução cai para 0,53, abaixo do limite de 1,5 em −0,97.

O limite de resolução é seu

Considera-se, por convenção, que Rs a partir de 1,5 indica separação até a linha de base. O campo traz esse valor típico, mas métodos regulados ou farmacopeias podem exigir um critério mais exigente: confira o do seu método. A margem mostrada é a resolução menos esse limite.

• A largura w é a largura da base do pico. Com largura medida em outro ponto do pico, a fórmula de pratos é outra e esta página não se aplica.
• Os tempos de retenção do primeiro e do segundo pico estão na mesma unidade das larguras.
• O segundo pico não pode sair antes do primeiro e o soluto não pode andar mais que a frente do solvente: fora disso a página recusa o cálculo.

Perguntas frequentes