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Curva de calibração: equação, LOD, LOQ e concentração da amostra

Informe os padrões (concentração e sinal) e o sinal da amostra: veja a reta de calibração, o R², o LOD, o LOQ e a concentração da amostra com o intervalo de confiança.

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Entrada

0 de 20.000 caracteres

De 3 a 1000 concentrações, separadas por quebra de linha ou ponto e vírgula, com vírgula ou ponto decimal e sem separador de milhar.

0 de 20.000 caracteres

O sinal medido de cada padrão, na mesma ordem das concentrações.

0 de 20.000 caracteres

Sinais de réplicas do branco. Obrigatórias (ao menos 2) com o desvio do branco.

0 de 40 caracteres

O sinal medido da amostra, para calcular a concentração.

Desvio usado em LOD e LOQ

Escolha a convenção do seu protocolo e cite-a no relatório.

2 de 40 caracteres

Maior que 0 e menor que 100 (padrão 95).

De 0 a 10 casas (padrão 4).

Arredondamento do meio

Como arredondar quando o dígito seguinte é exatamente 5.

Resultado

O resultado aparece aqui.

O que a ferramenta calcula

Informe a concentração e o sinal medido de cada padrão (mínimo de três) e, se quiser, o sinal da amostra. A ferramenta ajusta a reta de calibração por mínimos quadrados e calcula a sensibilidade (inclinação), o R², o desvio residual, o limite de detecção (LOD), o limite de quantificação (LOQ) e a concentração da amostra com o intervalo de confiança.

LOD = 3,3 × σ ÷ inclinação; LOQ = 10 × σ ÷ inclinação; concentração da amostra = (sinal − intercepto) ÷ inclinação

Os fatores 3,3 e 10 são os da diretriz ICH Q2(R1). O σ é o desvio padrão residual da reta ou, se você preferir, o desvio das réplicas do branco: o resultado mostra qual foi usado, e os dois podem dar LOD e LOQ bem diferentes.

Exemplo: seis padrões

Com seis padrões de 0 a 10, a reta tem inclinação 0,1007, intercepto -0,0001 e R² de 0,9999. Com σ residual de 0,0044, o LOD é 0,1427 e o LOQ é 0,4323. Uma amostra com sinal 0,35 tem concentração de 3,4755, com intervalo de 95% de 3,3457 a 3,6052.

Convenção de σσLODLOQ
Desvio residual da reta0,00440,14270,4323
Desvio de 4 réplicas do branco0,00090,02800,0848

Cuidados

  • Escolha a convenção de σ antes de olhar o resultado e cite-a no relatório: com o desvio do branco são necessárias ao menos 2 réplicas.
  • O intervalo da concentração vale para uma única medida da amostra e usa a distribuição t de Student com n − 2 graus de liberdade.
  • Amostra com sinal fora da faixa dos padrões é extrapolação, e a ferramenta não avisa.
  • É uma estimativa por regressão, não uma validação completa de método analítico.

Perguntas frequentes

Como calcular LOD e LOQ pela curva de calibração?

Divida 3,3 (LOD) ou 10 (LOQ) vezes o desvio σ pela inclinação da reta: no exemplo, LOD = 0,1427 e LOQ = 0,4323.

Como achar a concentração da amostra pela curva de calibração?

Subtraia o intercepto do sinal da amostra e divida pela inclinação: no exemplo, 3,4755.

Qual desvio usar no LOD: o do branco ou o residual da reta?

Depende do seu protocolo. No exemplo o desvio do branco dá LOD = 0,0280, contra 0,1427 pelo residual da reta; cite sempre a convenção usada.

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