Km e Vmax por Lineweaver-Burk, Eadie-Hofstee e Hanes-Woolf
Informe a concentração de substrato e a velocidade de cada ensaio e escolha o método: veja Km, Vmax, a equação da reta e o R².
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Três linearizações de Michaelis-Menten
Informe a concentração de substrato [S] e a velocidade inicial v de cada ensaio, e escolha o método. Cada um transforma os pontos para que a relação vire uma reta, ajustada por mínimos quadrados, e os parâmetros saem da inclinação e do intercepto.
v = Vmax × [S] ÷ (Km + [S])
| Método | Reta | Vmax | Km |
|---|---|---|---|
| Lineweaver-Burk | 1/v contra 1/S | 1 ÷ intercepto | inclinação ÷ intercepto |
| Eadie-Hofstee | v contra v/S | intercepto | −inclinação |
| Hanes-Woolf | S/v contra S | 1 ÷ inclinação | intercepto ÷ inclinação |
Exemplo: seis concentrações
Com [S] de 0,5 a 16 e velocidades de 0,24 a 1,02, os três métodos dão resultados próximos, mas não iguais: Lineweaver-Burk, Km = 1,993 e Vmax = 1,205 (R² 0,999); Eadie-Hofstee, Km = 1,870 e Vmax = 1,169 (R² 0,993); Hanes-Woolf, Km = 1,714 e Vmax = 1,136 (R² 1,000).
| Método | Km | Vmax | R² |
|---|---|---|---|
| Lineweaver-Burk | 1,993 | 1,205 | 0,999 |
| Eadie-Hofstee | 1,870 | 1,169 | 0,993 |
| Hanes-Woolf | 1,714 | 1,136 | 1,000 |
Cuidados
- Lineweaver-Burk dá peso demais às concentrações baixas de substrato e distorce o ajuste; por isso os três métodos divergem. O ajuste não linear direto de Michaelis-Menten é mais confiável e não é feito aqui.
- Km ou Vmax zero, negativo ou indefinido indicam dados inadequados: a ferramenta avisa.
- Não pode haver zero em [S] nem em v nos métodos que dividem por eles.
- Para prever a velocidade em uma concentração, digite-a no campo de previsão.
Perguntas frequentes
Como calcular Km e Vmax por Lineweaver-Burk?
Faça a reta de 1/v contra 1/[S]: Vmax é 1 dividido pelo intercepto e Km é a inclinação dividida pelo intercepto. No exemplo, Km = 1,993 e Vmax = 1,205.
Qual a diferença entre Lineweaver-Burk, Eadie-Hofstee e Hanes-Woolf?
Cada método lineariza a equação de Michaelis-Menten de um jeito e pesam os pontos de modo diferente; por isso os parâmetros variam um pouco.
Como calcular Km e Vmax pelo método de Hanes-Woolf?
Faça a reta de S/v contra S: Vmax é 1 dividido pela inclinação e Km é o intercepto dividido pela inclinação. No exemplo, Km = 1,714.